Подбор эффективного стерилизующего агента для подавления роста микроорганизмов в ходе подготовительного этапа культивирования in vitro влияет на успешность всех последующих стадий в микроклональном размножении. Целью исследования являлась оценка возможности применения и эффективности действия химических соединений на основе полигексаметиленгуанидин хлорида на микрофлору, выделенную в ходе культивирования in vitro модельного объекта Сalligonum aphyllum (Pall.) Gurke. Объекты исследований: чистые штаммы культур микроорганизмов, выделенные с эксплантов исследуемых объектов in vitro. Определено влияние препаратов, используемых в стандартных протоколах для стерилизации (растворы перекиси водорода и средство для дезинфекции «Белизна»), на рост выделенных чистых штаммов с С. aphyllum. Проведено сравнение их со стерилизующими агентами на основе полигексаметиленгуанидин хлорида и оценено их действие методом диффузии лунок в агар. Подтверждена антимикробная активность препаратов «Дезовер» и «Дезавид в дорогу» в отношении исследуемых микроорганизмов, выделенных с С. aphyllum. Растворы перекиси водорода (10 %) и «Белизна» (10 %) не оказали стабильного действия на все выделенные в ходе исследования микроорганизмы, что говорит об относительной устойчивости к ним исследуемых штаммов. Информация необходима для разработки эффективного протокола стерилизации эксплантов С. aphyllum. Работа выполнена в рамках государственного задания НИР Федерального научного центра агроэкологии РАН № 122020100427-1 «Разработать научные основы сохранения и воспроизводства ценных генотипов древесных и кустарниковых растений в культуре in vitro».
The selection of an effective sterilizing agent to suppress the microbial growth during the preparatory stage of in vitro cultivation affects the success of all subsequent stages in micropropagation. The study’s aim was to assess the possibility of using and the efficiency of chemical compounds based on polyhexamethylene guanidine chloride on the microflora isolated during in vitro cultivation of model plants – Сalligonum aphyllum (Pall.) Gurke. The study objects were pure microbial strains isolated from explants of the studied samples in vitro. The preparation effects used in standard sterilization protocols (hydrogen peroxide solutions and Belizna) on the growth of isolated pure strains of C. aphyllum were determined. They were compared with sterilizing agents based on polyhexamethylene guanidine chloride, and their action was evaluated by the diffusion method to the meduim. The antimicrobial activity of the preparations “Desover” and “Dezavid v dorogu” in relation to the studied microorganisms was confirmed. Solutions of hydrogen peroxide (10 %) and “Belizna” (10 %) did not have a stable effect on all microorganisms isolated during the study, which indicates the relative resistance of the studied strains to them. Information is needed to develop effective sterilization protocols for in vitro explants of С. aphyllum. The work was carried out within the framework of the state research assignment of the Federal Scientific Center for Agroecology of the Russian Academy of Sciences No. 122020100427-1 “To develop the scientific basis for the conservation and reproduction of valuable genotypes of tree and shrub plants in in vitro culture”.
1. Безбородова Н.А., Соколова О.В., Кривоногова А.С., Зубарева В.Д., Кожуховская В.В. Фенотипическая и генотипическая антибиотикорезистентность бактерий семейства Enterobacteriaceae, выделенных в сельскохозяйственных предприятиях Уральского региона // Труды Кубанского государственного аграрного университета. 2021. № 92. С. 201–210. DOI: 10.21515/1999-1703-92-201-210.
2. Курицкая Т.О., Наумов Н.М., Железнякова А.А., Володин А.Д., Наумов М.М. Использование препаратов полигексаметиленгуанидин гидрохлорида (ПГМГ ГХ) в лечении ран // Региональный вестник. 2017. № 1 (6). С. 2–9.
3. Очиров О.С., Бурасова Е.Г., Стельмах С.А., Григорьева М.Н., Окладникова В.О., Могнонов Д.М. Антимикробная активность производных полигексаметиленгуанидина гидрохлорида по отношению к мультирезистентным штаммам микроорганизмов // Инфекция и иммунитет. 2022. Т. 12, № 1. C. 193–196. DOI: 10.15789/2220- 7619-AAO-1751.
4. Акимова С.В. Фитосанитарная и биологическая эффективность клонального микроразмножения: автореф. дис. … докт. сельхоз. наук. Большие Вяземы, 2022. 38 с.
5. Высоцкий В.А. Подходы к прогнозированию конечного выхода растений при клональном микроразмножении плодовых и ягодных культур // Селекция и сорторазведение садовых культур. 2019. Т. 6, № 1. С. 24–26.
6. Маркова М.Г., Сомова Е.Н. Оптимизация приемов введения садовых растений в стерильную культуру in vitro // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. 2022. № 4. С. 71–81. DOI: 10.26897/0021-342Х-2022-4-71-81.
7. Romadanova N.V., Tolegen A.B., Kushnarenko S.V., Zholdabayaeva E.V., Bettoni J.C. Effect of Plant Preservative Mixture TM on Endophytic Bacteria Eradication from In Vitro-Grown Apple Shoots // Plants 2022. Vol. 11, Is. 19. P. 2624. DOI: 10.3390/plants11192624.
8. Huerta-Olalde A.M., Hernández-García A., López-Gómez R., Fernández-Pavía S.P., Zavala-Páramo M.G., Salgado-Garciglia R. In vitro selection of blackberry (Rubus fruticosus ‘Tupy’) plants resistant to Botrytis cinerea using gamma ray-irradiated shoot tips // Plant Biotechnology. 2022. Vol. 39, Is. 2. P. 165–171. DOI: 10.5511/plantbiotechnology.22.0312b.
9. Мацнева О.В., Ташматова Л.В., Хромова Т.М. Введение сортов земляники в культуру in vitro // Плодоводство и ягодоводство России. 2019. Т. 26. С. 28–34. DOI: 10.31676/2073-4948-2019-56-28-34.
10. Маркова М.Г., Сомова Е.Н. Оптимизация приемов введения садовых растений в стерильную культуру in vitro // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. 2022. № 4. С. 71–81. DOI: 10.26897/0021-342Х-2022-4-71-81.
11. Терещенко Т.В., Жолобова О.О. Эффективные способы стерилизации семян Rоbiniа рsеudоасасiа L. для введения в культуру in vitrо // Научно-агрономический журнал. 2022. № 2 (117). С. 62–67. DOI: 10.34736/FNC.2022.117.2.008.62-67.
12. Романенко А.К., Солонкин А.В., Соломенцева А.C., Егоров С.А. Использование гуминовых препаратов для выращивания посадочного материала древесных растений в аридном регионе // Аграрный вестник Урала. 2022. № 06 (221). С. 2–15. DOI: 10.32417/1997-4868-2022-221-06-2-15.
13. Дзюбенко Н.И., Бухтеева А.В., Кочегина А.А. Многолетние и однолетние засухо- и солеустойчивые кормовые растения в вавиловской коллекции // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2017. № 178 (1). С. 5–23. DOI: 10.30901/2227-8834-2017-1-5-23.
14. Кисленко Н.Н. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии. М.: КолосС, 2005. 232 с.
15. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Государственная фармакопея РФ. XIII. Изд. М.: ФЭМБ, 2015.