Сафенкова И.В.
1
Костенко С.Н.
1
Петракова А.В.
1
Урусов А.Е.
1
Садыхов Э.Г.
1
Жердев А.В.
1
Дзантиев Б.Б.
1
1 Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН (119071
Для иммунодетекции охратоксина A (ОТА) с использованием оптической биосенсорной системы Biacore разработаны и апробированы две схемы конкурентного анализа: 1) иммобилизация антител и конкуренция свободного (определяемого) ОТА и конъюгата ОТА в растворе; 2) иммобилизация конъюгата ОТА-белок и конкуренция свободного ОТА и иммобилизованного ОТА в конъюгате за центры связывания антител. Для реакции взаимодействия моноклональных антител и ОТА, иммобилизованного на поверхности чипа биосенсора, определены средние значения констант: 3,5*104 М-1 сек-1 (кинетическая константа ассоциации); 2,440-4 сек-1 (кинетическая константа диссоциации); 1,5408 М-1 (равновесная константа диссоциации). Конкурентный анализ с низким пределом обнаружения был реализован на основе схемы с иммобилизованным конъюгатом. Для разработанной системы предел обнаружения ОТА равняется 0,4 нг/мл, рабочий диапазон количественного определения - 0,5-20 нг/мл; среднеквадратичное отклонение сигнала (n=3) не превышает 7%. Максимальное среднеквадратичное отклонение сигнала получено в диапазоне высоких (более 10 нг/мл) концентраций. Продолжительность одного цикла измерений - 12 мин.
Библиографическая ссылка
Сафенкова И.В., Костенко С.Н., Петракова А.В., Урусов А.Е., Садыхов Э.Г., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОХРАТОКСИНА А С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОПТИЧЕСКОГО СЕНСОРА BIACORE // Научное обозрение. Биологические науки. 2014. № 1. С. 109-110;URL: https://science-biology.ru/ru/article/view?id=149 (дата обращения: 19.05.2025).